Delezione della sindrome 18p

Abstract

La delezione del braccio corto del cromosoma 18 è considerata una delle aberrazioni cromosomiche più frequenti, causando un’anomalia minima visibile alla nascita. Di solito diventa più evidente dopo 3 anni., Il probando è un maschio di 15 anni che ha avuto fenotipi manifestati principalmente da brachicefalia, facce larghe, ptosi, angoli della bocca abbassati, anomalie dei denti, collo largo con bassa attaccatura dei capelli posteriore, torace del tunnel, anomalie della mano, ritardo mentale che va da lieve a grave e altre malformazioni. Inoltre, l’analisi cromosomica per entrambi i genitori ha mostrato cariotipi normali.

Le caratteristiche fonotipiche erano abbastanza simili in altri casi e in accordo con il fenotipo usuale di del (18p) suggerito all’interno degli stessi casi e tra i casi del (18p) descritti., L’anomalia è stata più chiara con uno studio cromosomico ad alta risoluzione, che è la rilevazione di sottili riarrangiamenti cromosomici che è possibile solo se la risoluzione delle bande è abbastanza alta da consentire la loro visualizzazione.

La delezione del braccio corto del cromosoma 18 è ora una ben nota aberrazione cromosomica. È stato descritto per la prima volta dal genetista francese Jean de Grouchy nel 1963.1 Da allora, sono stati segnalati più di 100 casi.,2

Tra i genetisti esiste la convinzione che ci siano persone con del (18p) che sono così lievemente colpite da poter sfuggire alla diagnosi fino a quando la loro progenie non ha una grave del (18p) che è più gravemente colpita. Anche se questo può essere vero, c’è solo 1 rapporto in letteratura per convalidarlo.3

Le manifestazioni fenotipiche di questo tipo di delezione sono molto scarse alla nascita. Il rapporto tra femmina e maschio è 3: 2 e il peso alla nascita è in media di 2600 g., Le anomalie più frequenti consistono in deficit di crescita da lieve a moderata, ritardo mentale, microcefalia, ptosi, pieghe epicantali, basso ponte nasale, ipertelorismo, grandi orecchie sporgenti, oloprosencefalia e clinodattilia del quinto dito (che è stata osservata in circa il 10% e il 20% dei casi, rispettivamente). Il ritardo mentale è stato da lieve a grave con un quoziente intellettivo medio (QI) compreso tra 45 e 50. Inoltre, c’era una significativa discrepanza tra le prestazioni verbali e non verbali, con le prestazioni verbali più gravemente colpite.Sono anche riportate distonie 2,9–10.,10

Ci sono stati diversi record in letteratura di pazienti affetti da del (18p) che hanno sperimentato una carenza di ormone della crescita.4-7 Una coorte di indagine di famiglie registrate che hanno figli con del (18p) ha mostrato che 13 dei 16 bambini i cui genitori hanno restituito il questionario erano anormalmente brevi. Molti degli intervistati avevano figli che erano quindi troppo giovani per avere un fallimento della crescita post-natale. Di quei bambini, alcuni erano sulla terapia sostitutiva dell’ormone della crescita.

Degli 11 pazienti sottoposti al test dell ‘ ormone della crescita, 4 non erano carenti., Pertanto, da questo piccolo sondaggio è emerso che la grande maggioranza dei bambini con del (18p) era anormalmente breve, e dei bambini corti testati per la carenza di ormone della crescita, il 64% era carente di ormone della crescita. La maggior parte dei bambini in terapia sostitutiva con l’ormone della crescita ha risposto bene al trattamento.

Ci sono anche diverse segnalazioni di individui con del (18p) e distonia, che è un disturbo del movimento caratterizzato da torsione involontaria o movimento ripetitivo e posture anormali.L ‘ età di insorgenza di questo disturbo del movimento era compresa tra i 12 e i 17 anni.,

Si pensava che la maggior parte dei casi di del (18p) provenisse da delezioni de novo, che rappresentano circa l ‘ 85% dei casi.11 Si sospetta che il resto provenga da una trasmissione familiare sbilanciata di riarrangiamenti cromosomici strutturali. Inoltre, nuove tecniche citogenetiche hanno mostrato 1 caso di traslocazione subtelomerica sbilanciata che causa del (18p).,12

D’altra parte, lo studio cromosomico ottimale per questa preparazione del campione è una funzione di molti fattori, tra cui i seguenti: inizio della coltura di densità, tempo ottimale di raccolta, concentrazione e durata esposta a un arresto mitotico e trattamento ipotonico appropriato. Questi fattori sono essenziali per la diffusione cromosomica, che sono essenziali per ottenere una buona preparazione metafase. La lunga preparazione cromosomica è stata ottenuta attraverso la sincronizzazione del ciclo cellulare o l’uso di vari reagenti anti-contrazione cromosomica., Inoltre, altri fattori altrettanto importanti sono l’umidità relativa, il flusso d’aria e la temperatura ambiente durante il processo di fabbricazione delle diapositive. Il presente studio evidenzia l’importanza di ottenere una preparazione cromosomica più lunga con qualità di banding ottimali.

Case Report

Il probando è un maschio di 15 anni nato dopo una normale gestazione e parto senza complicazioni. La madre aveva 35 anni. Il paziente è stato indicato per escludere la sindrome X fragile dalla citogenetica., Le manifestazioni fenotipiche erano le seguenti: brachicefalia, viso largo, ptosi, angoli della bocca abbassati, anomalie dei denti, collo largo con un’attaccatura dei capelli posteriore bassa, torace del tunnel, anomalie della mano, ritardo mentale con difficoltà nelle capacità di memoria e nelle regole sociali e altre malformazioni.

L’analisi cromosomica dei linfociti del sangue periferico eparinato in eparina sodica è stata effettuata utilizzando la banda GTG in colture sincronizzate di 72 ore in RPMI 1640 completo. Un ml di sangue intero è stato utilizzato per inoculare ogni mezzo di matraccio da 10 ml., Quarantotto ore dopo l’inizio della coltura, la coltura del sangue è stata sincronizzata con 100 mL di timidina in eccesso e restituita all’incubatrice per altre 24 ore. Successivamente, 100 ml di colcemid sono stati aggiunti alla coltura e incubati per altri 15 minuti.

La procedura è stata eseguita sul padre e sulla madre del probando. L’analisi del probando ha rivelato un complemento 46, XX, del (18) (p11.2) in tutte le 38 cellule analizzate (Immagine 1). La sindrome X fragile è stata esclusa dalla citogenetica., La madre e il padre del probando hanno rivelato il cariotipo normale 46-XX cariotipo per la madre e il cariotipo XY per il padre.

Discussione

Presentiamo questo caso di un ragazzo con una cancellazione 18p. Le caratteristiche fenotipiche erano abbastanza simili in tutti gli altri casi e in accordo con il fenotipo usuale di del (18p). Un’altra caratteristica coerente in tutti i casi del (18p) è stato scarso risultato intellettuale. In primo luogo, Uchida15 ha descritto un bambino con un del (18p) che ha avuto anche un ritardo dello sviluppo, eseguendo al 65% -70% della normalità. Inoltre, Velagaleti14 ha presentato una ragazza con un 18p11.,2 con valutazione psicosociale che ha rivelato un QI verbale di 63 e un QI di fondo scala di 69, coerente con un lieve ritardo mentale. Un altro studio di Tsukahara15 ha mostrato un bambino giapponese che portava anche del (18p11.2) con un QI di 74 con un significativo ritardo del linguaggio, ponendolo su un livello di funzionamento intellettuale borderline.

Vorremmo sottolineare il fatto che tra i casi presentati sopra, la delezione del cromosoma 18p era una rara malattia cromosomica in cui veniva eliminato tutto o parte del braccio corto (p) del cromosoma 18., Il disturbo è tipicamente caratterizzato da bassa statura, gradi variabili di ritardo mentale, ritardi del linguaggio, malformazioni del cranio e della regione facciale (craniofacciale) e/o anomalie fisiche aggiuntive.

Associati difetti cranio-facciali possono variare notevolmente in gamma e la gravità del caso., Tuttavia, tali caratteristiche includono comunemente una testa insolitamente piccola (microcefalia), un naso ampio e piatto, una bocca “a forma di carpa”, orecchie grandi e sporgenti, occhi ampiamente distanziati (ipertelorismo oculare) e/o altre anomalie., Raramente (cioè, in circa il 10% dei casi), altri reperti neurologici e/o difetti facciali della linea mediana estremamente variabili, come la presenza di un singolo dente anteriore centrale (incisivo mascellare), occhi ravvicinati (ipotelorismo), un solco anormale nel labbro superiore (labbro leporino); chiusura incompleta del tetto della bocca (palatoschisi) e/o, nei casi più gravi, assenza del naso e/o ciclopia. La ciclopia è caratterizzata dalla fusione delle cavità oculari (orbite) in una singola cavità contenente 1 occhio., Una ricerca di Rigola16 ha discusso il fatto che nessuno dei casi pubblicati aveva una storia di aborto spontaneo.

D’altra parte, ci siamo concentrati sull’importanza dell’alta risoluzione dei cromosomi nel rilevare l’anomalia del (18p), in cui i cromosomi si accorciano progressivamente man mano che la cellula progredisce dall’interfase alla metafase. Questo comportamento permette che la cromatina sia impacchettata ordinatamente per la segregazione nelle cellule figlie all’estremità di telophase., Man mano che le tecniche di coltura cellulare si evolvono, l’analisi citogenetica si è gradualmente spostata dall’essere eseguita sui cromosomi mid-metafase a cromosomi più precoci metafase o addirittura tardivi profase.

Questo può essere realizzato (studio cromosomico ad alta risoluzione) sincronizzando il ciclo cellulare con un blocco nella fase S e il successivo rilascio con un agente di rilascio. Sono disponibili diversi reagenti a blocchi e a rilascio, come un blocco di metotrexato con rilascio di timidina o un blocco di timidina in eccesso con 2-deossicitidina come agente di rilascio.,

Nel nostro laboratorio, cromosomi lunghi ad alta risoluzione vengono regolarmente raccolti con un campione di sangue. Questo risultato è ottenuto da una combinazione della sincronizzazione cellulare e l’aggiunta di additivi anti-contrazione dei cromosomi. I protocolli che impieghiamo comprendono un blocco di 24 ore con timidina in eccesso, ma senza un periodo di rilascio di accompagnamento. Questa strategia non blocca completamente la sintesi del DNA, ma invece prolunga la fase S in modo che la condensazione cromosomica si riduca man mano che le cellule procedono verso la metafase., Il rilevamento di sottili riarrangiamenti cromosomici è possibile solo se la risoluzione delle bande è abbastanza alta da consentirne la visualizzazione.

Questo rapporto presenta un caso di sindrome del (18p), in cui le caratteristiche fenotipiche erano simili in tutti gli altri casi e in accordo con il fenotipo usuale di del (18p), suggerito all’interno degli stessi casi e tra i casi del (18p) descritti. Del (18p) è solitamente causato da errori spontanei (de novo) molto presto nello sviluppo dell’embrione che sembrano verificarsi casualmente per ragioni sconosciute.,

I laboratori di citogenetica hanno la responsabilità di raggiungere e mantenere un elevato standard di competenza. Ciò include l’istituzione di metodologia e protocolli tecnici che produrranno costantemente una lunga preparazione cromosomica in modo che sottili riarrangiamenti possano rilevare l’anomalia del (18q). Queste anomalie possono essere mancate con preparazioni cromosomiche che hanno una bassa risoluzione delle bande o con quelle preparazioni che hanno una morfologia povera e una banda subottimale.,