Taylor comenzó en el teatro. A lo largo de los años 1960, 70 y 80, apareció en numerosas producciones de Broadway y off-Broadway, incluyendo papeles estelares en Butley de Simon Gray y The Cocktail Hour de A. R. Gurney; por este último, fue nominada para un Premio Drama Desk. En 1983, Taylor apareció en Breakfast with Les and Bess, lo que llevó al crítico de Teatro de la revista New York magazine John Simon a cantar,»…La Srta. Taylor es una de las pocas actrices con mucha gracia, atractiva, elegante y técnicamente lograda en nuestro teatro…,verla puede convertirte, como yo, en un loco de Taylor…»
Taylor tomó el papel de Denise Cavanaugh en la telenovela The Edge of Night, que se suicidó solo para incriminar a su marido. Luego alentada por su entrenadora de actuación, Stella Adler, Taylor tomó un papel que la haría bien conocida: el jefe sexy y exigente de Tom Hanks en la comedia de 1980 Bosom Buddies.
ella demostró ser igualmente experta en comedia y drama. En 1985, co-protagonizó con Lisa Eilbacher en la serie de detectives de ABC Me and Mom., Dos años más tarde, interpretó junto a Alan Arkin en la breve comedia de ABC Harry, en la que recibió una facturación «protagonizada». En 1990, Taylor se reunió con los productores ejecutivos de Bosom Buddies Thomas L. Miller y Robert L. Boyett para un papel en su sitcom de ABC Going Places, interpretando a la productora de televisión de grand dame Dawn St. Claire para los primeros 13 episodios de la serie. De 1992-93, protagonizó The Powers That Be de Norman Lear con John Forsythe y David Hyde Pierce, interpretando a la esposa del personaje de Forsythe, un senador estadounidense.,
a principios de 1994, se unió al elenco de Saved by the Bell: The College Years como Dean Susan McMann, justo episodios antes de su cancelación. Después de esto fue su papel como editora de periódicos de alta potencia Camilla Dane en la comedia de ABC/NBC The Naked Truth; Taylor fue uno de los pocos miembros del elenco para durar a través de toda la serie hasta 1998, a pesar de varios cambios.
interpretó el papel de la jueza Roberta Kittleson en la práctica. Originalmente destinado a ser una aparición de una sola vez, el papel duró desde 1998 hasta 2003., Ganó el Premio Primetime Emmy a la Mejor Actriz de reparto en una serie dramática en 1999; en su discurso de aceptación, es recordada por reclamar la estatua y exclamar: «¡de la noche a la mañana! Taylor agradeció a David E. Kelley, productor/escritor y creador de la práctica, por » darme un carro para montar aquí arriba: una mujer que pone una bandera en la luna para las mujeres mayores de 40-que puede pensar, que puede trabajar, que son éxitos, que puede cocinar, y que puede cocinar! Fue nominada en la misma categoría para el mismo papel al año siguiente.,
Taylor también fue nominada para el Premio Emmy de Primetime a la mejor actriz invitada en una serie de comedia por su papel recurrente en The Lot de AMC, y ha sido nominada para los Emmys cinco veces desde 2003: cuatro por Mejor Actriz de reparto en una serie de comedia por su papel en la serie de televisión Two and a Half Men, interpretando a Evelyn Harper, la esnob, madre dominante de los personajes de Charlie Sheen y Jon Cryer, y una por Mejor Actriz de reparto en una serie limitada o película por su papel como Ellen Kincaid, una ejecutiva de estudio y mentora para aspirantes a actores, en la miniserie Hollywood., Los papeles invitados de Taylor en películas y series de televisión han sido extensos e incluyen apariciones en Er y Veronia’s Closet, y papeles recurrentes en Ally McBeal y Monk, y como la multimillonaria Peggy Peabody en The L Word.
Los papeles de la película de Taylor han incluido el duro profesor de derecho de Harvard del personaje de Reese Witherspoon en la comedia de 2001 Legally Blonde, la madre del personaje de Tina Fey en Baby Mama, The Truman Show, Happy Accidents, Next Stop Wonderland, George of the Jungle, the Wedding Date, How to Make an American Quilt, Romancing the Stone, D. E. B. S., Cop and a Half, Y One Fine Day.,
Los papeles animados de Taylor incluyen el de Prudence, el mayordomo del castillo y el interés amoroso del Gran Duque, en Cenicienta II y Cenicienta III: un giro en el tiempo de Disney. También interpretó un papel en el programa animado American Dad! como la madre biológica de Francine.
Holland Taylor en 2008.
Taylor comenzó a investigar, escribir y producir una obra de teatro de una sola mujer sobre la fallecida Gobernadora de Texas Ann Richards en 2009., La obra en dos actos, originalmente titulada Money, Marbles, and Chalk, protagonizada por Taylor como Richards, fue trabajada por primera vez en mayo de 2010 en el Grand 1894 Opera House en Galveston, Texas. Más tarde fue retitulado Ann: An Affectionate Portrait of Ann Richards y se estrenó en Chicago el 16 de noviembre de 2011, donde fue anunciado como un compromiso «pre-Broadway». Jugó en el Kennedy Center en Washington, D. C., desde el 17 de diciembre de 2011 hasta el 15 de enero de 2012. El espectáculo se estrenó en Broadway en el Teatro Vivian Beaumont el 7 de marzo de 2013., Por este papel, Taylor fue nominada para el Premio Tony a la mejor actriz principal en una obra de Teatro. PBS Great Performances transmitió el estreno de la obra, ahora titulada simplemente Ann, el 19 de junio de 2020. Había sido grabado en el Zach Theater en Austin, Texas, después de su gira nacional y de Broadway.